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目的
观察利用RNA干扰(RNAi)技术沉默炎性乳腺癌(IBC)细胞SUM149和SUM190 RhoC基因对肿瘤细胞侵袭的影响。
方法人炎性乳腺癌细胞按均衡随机方法分为空白对照组、阴性脂质体组、RhoC-小干扰RNA(siRNA)转染组,人炎性乳腺癌细胞SUM149和SUM190中转染RhoC-siRNA,利用显微镜分析转染效率。转染后48 h,应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测RhoC mRNA的表达水平,应用Western blot检测RhoC蛋白的表达水平。利用Transwell小室检测转染后肿瘤细胞的侵袭能力。
结果应用RhoC-siRNA转染人炎性乳腺癌细胞SUM149和SUM190,转染效率可以达到80%。在SUM149细胞中,阴性脂质体组与RhoC-siRNA转染组RhoC蛋白的平均表达水平分别为0.897±0.376、0.375±0.164,差异有统计学意义(t=6.274,P=0.045)。在SUM190细胞中,阴性脂质体组与RhoC-siRNA转染组RhoC蛋白的平均表达水平分别为0.902±0.386、0.381±0.166,差异有统计学意义(t=6.891,P=0.028)。在侵袭实验中,SUM149细胞RhoC-siRNA转染组和阴性脂质体组穿膜细胞数分别为(85.6±12.7)、(340.5±43.4)个,差异有统计学意义(t=12.275,P=0.034)。SUM190细胞RhoC-siRNA转染组和阴性脂质体组穿膜细胞数分别为(92.8±15.6)、(345.9±47.7)个,差异有统计学意义(t=11.769,P=0.022)。
结论应用RhoC-siRNA转染人炎性乳腺癌细胞SUM149和SUM190,可以有效抑制肿瘤细胞的侵袭。