【摘 要】
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目的探讨在呼吸道合胞病毒(RSV)感染人支气管上皮(HBE)细胞中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)-叉头转录因子A2(forkhead transcription factor A2,FOXA2)通路参与黏液分泌的机制,以及过氧化物酶增殖激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮、拮抗剂(GW9662)和EGFR抑制剂(AG1478)对该
【机 构】
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目的探讨在呼吸道合胞病毒(RSV)感染人支气管上皮(HBE)细胞中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)-叉头转录因子A2(forkhead transcription factor A2,FOXA2)通路参与黏液分泌的机制,以及过氧化物酶增殖激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮、拮抗剂(GW9662)和EGFR抑制剂(AG1478)对该通路的干预作用。
方法建立HBE细胞RSV体外感染模型,随机分成6组:A组(AG1478+RSV)、B组(罗格列酮+RSV)、C组(GW9662+RSV)、D组(RSV)、E组(0.1% DMSO+HBE细胞)、F组(HBE细胞对照)。RSV感染HBE细胞造模前2 h,A、B、C组分别予10 μmol/L的AG1478、罗格列酮、GW9662预处理。A~D组以RSV感染吸附HBE细胞2 h后加维持液继续培养,各组分别培养至12 h、24 h、48 h收获细胞及上清液。应用RT-PCR检测各组EGFR、PPARγ、FOXA2 mRNA表达情况,Western blot检测p-EGFR及EGFR蛋白水平,ELISA检测上清液中黏蛋白5AC(MUC5AC)水平。
结果与F组相比,3个时间点A、B、C、D组的EGFR mRNA、p-EGFR/EGFR蛋白比值、MUC5AC蛋白表达量均明显增加,随时间增加表达量增加,在48 h达到最高;PPARγ mRNA均有所增加,其中A和B组表达量随时间逐渐增加,于48 h达到高峰,但D组逐渐减少;FOXA2 mRNA均有降低,其中D组表达量最低。与D组相比,A组和B组EGFR mRNA、p-EGFR/EGFR蛋白比值、MUC5AC蛋白表达量明显降低,FOXA2 mRNA明显升高。
结论RSV感染导致MUC5AC蛋白表达增加,PPARγ和EGFR-FOXA2信号通路参与RSV感染后气道黏液高分泌过程。
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