【摘 要】
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[目的]观察温阳消癥方对5/6肾切除小鼠肾功能、肾脏病理、纤维化指标及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smad3通路的影响,探讨该方对肾纤维化的保护作用及可能的机制.[方法]40只C57BL/6小鼠中随机选取10只作为假手术组,30只制作5/6肾切除模型,造模2周后测血清肌酐,确定造模成功,并将造模组随机分为温阳消癥组、缬沙坦组、模型组.温阳消癥组予温阳消癥方灌胃,缬沙坦组予缬沙坦灌胃,模型组与假手术组予等体积0.9％氯化钠注射液灌胃,给药8
【机 构】
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浙江中医药大学附属宁波中医院 宁波 315000;上海中医药大学附属曙光医院
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[目的]观察温阳消癥方对5/6肾切除小鼠肾功能、肾脏病理、纤维化指标及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smad3通路的影响,探讨该方对肾纤维化的保护作用及可能的机制.[方法]40只C57BL/6小鼠中随机选取10只作为假手术组,30只制作5/6肾切除模型,造模2周后测血清肌酐,确定造模成功,并将造模组随机分为温阳消癥组、缬沙坦组、模型组.温阳消癥组予温阳消癥方灌胃,缬沙坦组予缬沙坦灌胃,模型组与假手术组予等体积0.9％氯化钠注射液灌胃,给药8周后测定血清肌酐、尿素氮,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)及Masson染色观察肾脏病理学改变,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)和免疫印迹法检测肾组织 α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、TGF-β1、Smad3的mRNA和蛋白表达.[结果]与假手术组比较,模型组肾脏纤维化改变明显,血清肌酐、尿素氮、胶原染色阳性率及α-SMA、FN、TGF-β1、Smad3的mRNA和蛋白表达均显著升高(P＜0.01).与模型组比较,温阳消癥组和缬沙坦组小鼠的肾脏病理纤维化形态改变较轻,血清肌酐、尿素氮、胶原染色阳性率,α-SMA、FN、TGF-β1的mRNA和蛋白表达,Smad3蛋白表达均显著降低(P＜0.01);Smad3 mRNA表达降低(P＜0.01,P＜0.05).与缬沙坦组比较,温阳消癥组的α-SMA mRNA和蛋白表达,以及TGF-β1 mRNA表达显著降低(P＜0.01);胶原染色阳性率和FN mRNA表达降低(P＜0.05).[结论]温阳消癥方可改善5/6肾切除小鼠肾功能,减轻病理改变,下调肾纤维化标志物α-SMA及FN的表达,减轻细胞外基质(extracellular matrix,ECM)异常堆积,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad3信号通路有关.
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