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目的建立分离培养人真皮淋巴管内皮细胞(LECs)及其冷冻保存技术。方往采用中性蛋白酶及胶原酶消化结合免疫磁珠方法,分选CD34^-/CD31^+细胞。所获内皮细胞进行体外培养,经免疫荧光染色、RT—PCR鉴定证实为LECs。采用梯度降温法冻存内皮细胞,经复苏后进行形态学观察,以台酚蓝试验、MTT试验、流式细胞术细胞检测等方法鉴定细胞生物学特性。结景中性蛋白酶及胶原酶消化方法结合免疫磁珠分选,可从真皮组织获取高纯度的LECs。与新鲜细胞相比,复苏的内皮细胞活力保持在92%以上。复苏后的内皮细胞形态学、生物学