【摘 要】
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采用高保真聚合酶从质粒pBI121中扩增出1.8kb的专一条带,克隆入pBluescript SK载体,测序结果显示与报道一致.该克隆GUS基因被用作对照,再以此为模板,通过DNA重排技术,经DNase
【机 构】
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上海市农业遗传育种重点实验室,扬州大学生物科学与技术学院
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采用高保真聚合酶从质粒pBI121中扩增出1.8kb的专一条带,克隆入pBluescript SK载体,测序结果显示与报道一致.该克隆GUS基因被用作对照,再以此为模板,通过DNA重排技术,经DNaseⅠ降解,Primerless PCR, Primer PCR重新得到大量的突变GUS基因.这些突变的GUS基因构建入原核表达载体pG251中,电击转化大肠杆菌菌株DH5α,构建GUS基因突变体库,经过3轮的重排、筛选得到80℃处理30分钟仍显示较高活性的耐高温GUS基因GUS3-3,基因测序显示,GUS3-
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