【摘 要】
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以构建珍稀物种硬叶兜兰SSR-PCR反应体系，采取正交设计试验对硬叶兜兰SSR体系组分中的Mg2＋、基因组DNA、DNATaq聚合酶、dNTPs、引物5个因素在4个不同程度上进行了组合试验，之后
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以构建珍稀物种硬叶兜兰SSR-PCR反应体系，采取正交设计试验对硬叶兜兰SSR体系组分中的Mg2＋、基因组DNA、DNATaq聚合酶、dNTPs、引物5个因素在4个不同程度上进行了组合试验，之后对反应体系中该引物的退火温度在梯度PCR仪上筛选，并进行了最优体系的验证。试验结果显示：体积为10μL的PCR管中最优组合为：模板DNA20ng，Mg2＋3．0mmol／L，dNTPs0．3mmol／L，引物0．8μmol／L，Taq酶0．8U，10×buffer（Mg2＋ Free）1μL，引物PR71
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