大鼠HSG基因重组腺病毒载体的构建及鉴定

来源 :宁夏医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cser905
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目的构建大鼠增殖抑制基因(rat hyperplasia suppressor gene,rHSG)的腺病毒载体,观察其在转染大鼠C6胶质瘤细胞后的表达。方法由前期构建的pGM-T-rHSG质粒中酶切rHSG基因片段,亚克隆入pShut-tle-CMV-EGFP重组穿梭载体中,而后与腺病毒骨架质粒pAdxsi酶切连接,经过抗性筛选及酶切鉴定得到阳性的pAdxsi-GFP-rHSG重组质粒;pAdxsi-GFP-rHSG质粒经PacI线性化后转染293细胞,包装重组腺病毒,进行PCR鉴定和PCR产物测序鉴定
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