利用Bio-real-time PCR技术检测玉米内州萎蔫病菌

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玉米内州萎蔫病是北美玉米生产上的严重病害之一,为预防其传入我国,利用人工注射接种的方法模拟自然感病的玉米籽粒,通过Clavibacter michiganensis不同亚种的转录间隔区序列,设计了特异性的TaqMan-MGB探针,将Clavibacter michiganensis subsp.nebraskensis(Cmn)的半选择性培养基sCNS和特异性的探针结合,建立了进出境玉米种子上Cmn的Bio-real-time PCR检测方法,该方法可以检测到105粒玉米种子中含有一粒感病籽粒(带菌量为1.2×106 CFU/粒)的种子样品,可以应用于实际检测。 Maize wilting disease is one of the serious diseases in maize production in North America. In order to prevent its introduction into our country, artificial inoculation method is used to simulate the natural susceptible maize grain. Through the transcriptional spacer sequences of different subspecies of Clavibacter michiganensis, A specific TaqMan-MGB probe was used to bind the specific binding of sCNS and specific probe of Clavibacter michiganensis subsp. Nebraskensis (Cmn) to establish a Bio-real-time PCR detection of Cmn on entry and exit maize seeds Method, which can detect seed samples containing one grain of susceptible seeds (carrying amount of 1.2 × 10 6 CFU / grain) in 105 corn seeds and can be used for actual testing.
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