sigH-rshA过表达对BCG菌株致病性的影响

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卡介苗(Mycobacterium bovis Bacille Calmette-Guérin,BCG)是目前唯一许可的结核病预防用疫苗,但菌株间基因组水平的改变导致疫苗在保护效果、安全性等方面存在诸多差异。【目的】验证DU2 III和IV遗传型中sigH-rshA过表达与BCG菌株毒力变化的相关性。【方法】利用分子克隆技术构建了过表达sigH-rshA的重组BCG China和BCG Japan菌株,通过RT-PCR和Western-blotting验证基因表达。利用巨噬细胞和SCID小鼠感染模型评价重组BCG的毒力变化;ELISA试验评估炎症细胞因子TNF-α分泌。【结果】SigH-RshA蛋白过表达能够显著促进BCG的胞内增殖,同时刺激巨噬细胞产生更高水平的TNF-α分泌;SCID小鼠试验结果显示sigH-rshA过表达能提高重组BCG对免疫缺陷小鼠的毒力。【结论】sigH-rshA过表达能够增强BCG菌株对小鼠巨噬细胞和实验小鼠的致病性。
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