裂壳菌L-14原生质体制备与再生体系构建

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【目的】初步构建裂壳菌L-14原生质体制备和再生体系,为同源菌株原生质体制备研究提供理论依据。【方法】研究细胞壁裂解酶组合、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂种类对原生质体制备产量的影响,以获得最优制备方案,同时筛选适合的原生质体再生培养基。【结果】菌株经YEPG液体培养基培养7d后,使用0.7mol/L的NaCl作为渗透压稳定剂配置浓度各为20mg/mL的崩溃酶+裂解酶复合酶液,在30℃、80r/min条件下酶解5.5h后可获得较高的原生质体数量,利用PDS培养基的原生质体再生率可达10.65%,显著高于
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