【摘 要】
：
本研究通过设计简并引物及文献参考,PCR 克隆得到嗜热厌氧菌菌株 xyl-d 的SADH,并利用定点诱变技术将该酶的198位苷氨酸（Gly）突变为精氨酸（Arg）。将野生型和突变基因连接到原核表
【机 构】
：
四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室
【基金项目】
：
国家自然科学基金（No.31171586）,国家863计划（2012AA022204）
论文部分内容阅读
本研究通过设计简并引物及文献参考,PCR 克隆得到嗜热厌氧菌菌株 xyl-d 的SADH,并利用定点诱变技术将该酶的198位苷氨酸（Gly）突变为精氨酸（Arg）。将野生型和突变基因连接到原核表达载体pET28a,IPTG诱导表达,再经镍柱纯化,然后比较了两个蛋白分别以 NAD/NADH,NADP/NADPH 为辅因子、异丙醇或异丁醛为底物、55℃条件下的酶活。发现突变后蛋白的总体催化活性相对于野生型有所下降,其中突变蛋白对 NAD/NADH 的亲和性分别下降了约8倍和6倍,而且对NADPH 的亲和性下降
其他文献
【目的】研究外源肉碱对鲤鱼背肌脂肪酸组成及其CPT I基因表达的影响,为阐明肉碱调控脂肪酸代谢的机理提供理论依据。【方法】在基础饲料中分别添加0,50,100,150,200和400mg/
【目的】研究苹果疏除幼果与成熟果果胶品质的差异，为苹果资源的高效综合利用提供参考。【方法】以苹果疏果期的疏除幼果和成熟果榨汁后的果渣为原料，采用传统酸法提取苹果果胶
【目的】对外植体采用特殊处理方法,并对不同培养时期的基本培养基进行调整,以建立高效、快速、繁殖系数高的鄂西红豆再生技术体系。【方法】以成熟度为80%的鄂西红豆种子为
【目的】探讨夏蜡梅1年生实生苗的生长节律，为夏蜡梅高产栽培提供依据。【方法】以夏蜡梅蒴果播种后获得的1年生实生苗为材料，研究其种子萌发动态，建立幼苗苗高、地径的年生长模
【目的】克隆红花（Carthamus tinctoriusL．）黄酮合成途径中的关键酶查尔酮异构酶（Chalcone isomerase，CHI）基因的全长序列，研究其组织表达特异性，为红花代谢调控研究提供参考。【方法
【目的】获得转金属硫蛋白（MT）基因的拟南芥植株,为利用植物生物反应器规模化生产MT奠定基础。【方法】利用融合PCR方法,扩增拟南芥MT基因与油体蛋白oleosin基因的融合基因,将
【目的】研究谷子坡地的降雨入渗特征，为谷子坡地水分管理及防治水土流失提供科学依据。【方法】采用人工模拟降雨的方法，以裸露坡地为对照，研究中小雨强（40 mm/h）下，谷子拔节初期
【目的】建立禽偏肺病毒乳胶凝集试验检测方法,以快速、有效、准确地检测该病毒。【方法】用制备的禽偏肺病毒抗体致敏乳胶,与禽偏肺病毒反应,优化最佳致敏条件,建立禽偏肺病
【目的】研究He—Ne激光辐照不同时间对灯盏花组织培养的影响，为灯盏花的开发利用提供参考。【方法】以灯盏花的种子、无菌培养苗、叶片、愈伤组织及芽为材料，用He—Ne激光辐照
的黎波里会议中心是一座紧邻森林的两层建筑。整个建筑周围由青铜丝网围合,形成了一个保护内层玻璃幕墙的＂盾牌＂。该＂盾牌＂网状的围合结构透过开阔的入口门廊,向外围的景观敞开。