结核分枝杆菌Ag85B基因体外扩增、克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fgq861218
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目的体外扩增结核杆菌Ag85B基因,构建大肠埃希菌分枝杆菌穿梭质粒ps3000-Ag85B,并重组耻垢分枝杆菌(Mycobacteriurn smegmatis mc^2 155)。方法采用聚合酶链式反应(PCR)方法,体外扩增结核杆菌Ag85B基因,克隆人pGEMT载体;构建亚克隆ps3000Ag85B大肠埃希菌一分枝杆菌穿梭质粒,电转化方法将有Ag85B基因的穿梭质粒转化到耻垢分枝杆菌中。热诱导此重组耻垢分枝杆菌,用SDS—PAGE电泳观察Ag85B蛋白的表达,Westernblot鉴定其生物学活性。
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