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为了表达奶牛粒细胞.巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)并对其活性进行检测。根据GenBank中登录的牛GM.CSF基因序列(U22385),设计一对特异性引物;采用RT—PCR方法,以LPS体外诱导的奶牛肺泡巨噬细胞为材料,从总RNA中扩增出奶牛GM.CSFcDNA基因,克隆到pGEM.T载体中,经酶切鉴定与序列测定,结果显示克隆的奶牛GM.CSF基因与GenBank中登录的牛GM—CSF基因序列的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.7%和99.3%。构建pET32a.GM—CSF原核表达重组质粒,经IP