【摘 要】
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目的表达和纯化弓形虫P30(SAG1)蛋白,为弓形虫病快速诊断试剂盒及蛋白质疫苗的研制奠定基础.方法 PCR法从弓形虫基因组DNA 中扩增 P30基因片段,P30产物克隆到表达质粒pET-30a
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目的表达和纯化弓形虫P30(SAG1)蛋白,为弓形虫病快速诊断试剂盒及蛋白质疫苗的研制奠定基础.方法 PCR法从弓形虫基因组DNA 中扩增 P30基因片段,P30产物克隆到表达质粒pET-30a(+) 构建重组载体,将其转化到DH5α中.经PCR扩增和质粒酶切及基因测序鉴定后,阳性重组质粒转化到大肠埃氏菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定.大量的诱导表达产物用SNBC 3S NTA Resin方法纯化并进行复性.结果扩增的P30基因片段为75
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