【摘 要】
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目的构建针对人CASK基因的siRNA质粒,建立CASK下调表达的细胞模型,为CASK相关的细胞信号研究奠定基础.方法选择人CASK基因不同靶点,体外合成DNA模板,经退火后插入到pSilencer
【机 构】
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第三军医大学西南医院全军烧伤研究所
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目的构建针对人CASK基因的siRNA质粒,建立CASK下调表达的细胞模型,为CASK相关的细胞信号研究奠定基础.方法选择人CASK基因不同靶点,体外合成DNA模板,经退火后插入到pSilencer3.1 hygro载体的多克隆位点.阳性重组质粒转染ECV304细胞,蛋白印迹.观察siCASK对目的蛋白表达的抑制效率.结果酶切、测序表明以pSilencer3.1 hygro为载体的重组质粒siCASK构建成功.siCASK转染细胞后,能够明显抑制目的蛋白的表达.结论成功构建了siRNA重组质粒,为下一步C
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