【摘 要】
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目的优化获取兔骨髓间充质干细胞并对其进行纯化、鉴定,同时对其生物学性状进行研究。方法取新生新西兰大耳白兔骨髓5.0 mL,采用密度梯度离心法、贴壁筛选法并结合传代对其进
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,青岛大学医学院附属医院创伤骨科,南京鼓楼医院骨科
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目的优化获取兔骨髓间充质干细胞并对其进行纯化、鉴定,同时对其生物学性状进行研究。方法取新生新西兰大耳白兔骨髓5.0 mL,采用密度梯度离心法、贴壁筛选法并结合传代对其进行纯化,观察细胞形态、超微结构和表面标志物的表达,从而对其进行鉴定。观察第1、3、5、8、10代细胞的增殖情况,并绘制出生长曲线。结果经密度梯度离心、贴壁筛选并结合传代所得到的间充质干细胞很纯,第3代和第5代细胞形态单一,细胞排列具有典型的漩涡状结构。第1、3、5代细胞增殖能力强,生长旺盛;而第8、10代细胞增殖明显减弱。所分离培养的细胞表达CD44、CD90,不表达CD34,电镜观察为低分化细胞。结论分离培养的细胞为间充质干细胞且成分单一,具有干细胞特性,第3、5代细胞很纯且其增殖能力强,适用于做以后的研究。
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