【摘 要】
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睾丸特异性丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(testis-specific serine/threonine kinase,TSSK)首先在哺乳动物中被发现,是一类在精子发生过程起重要作用的蛋白激酶.通过EST同源筛选方法
【机 构】
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现代丝绸国家工程实验室,苏州大学医学部,苏州大学蚕桑研究所
【基金项目】
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江苏高校优势学科建设工程项目;现代农业产业技术体系专项;国家自然科学基金
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睾丸特异性丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(testis-specific serine/threonine kinase,TSSK)首先在哺乳动物中被发现,是一类在精子发生过程起重要作用的蛋白激酶.通过EST同源筛选方法,用人(Homo sapiens)的TSSK2、TSSK4、TSSK6基因cDNA和小鼠(Muss musculus)的TSSK1、TSSK3、TSSK5基因cDNA为探针在GenBank家蚕EST数据库中搜索同源基因,通过在家蚕基因组数据库的同源性检索以及电子克隆,获得一条家蚕精巢特异性蛋白激酶基因的序列,命名为Bm-TSSK(GenBank登录号:JN159476).据此预测序列设计引物,成功地在家蚕精巢组织中克隆了Bm- TSSK基因完整的开放阅读框(ORF),序列分析及同源性比对表明:Bm- TSSK序列长1402 bp,ORF为1041bp,没有内含子,推测编码346个氨基酸残基,在编码氨基酸序列20～284区域有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的结构域；该基因推导的氨基酸序列在进化上与赤拟谷盗(Tribolium castaneum)、熊蜂(Bombus terrestris)、顶切叶蚁(Acromyrmex echinatior)的亲缘关系较近,相似度分别为81％、86％和85％.基于定量PCR和基因芯片的数据分析显示Bm- TSSK在家蚕5龄第3天幼虫的精巢特异性高表达,推测Bm-TSSK参与了家蚕精子的形成.
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