【摘 要】
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目的 :在大肠杆菌中高效表达人表皮生长因子 (hEGF) ,并探索提高外源基因在pET - 3c :BL(DE3)表达系统的表达水平的途径。方法 :根据大肠杆菌对密码的偏爱性 ,合成编码 5 3个
【基金项目】
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国家 2 11工程项目 (活性肽及其基因调节 )
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目的 :在大肠杆菌中高效表达人表皮生长因子 (hEGF) ,并探索提高外源基因在pET - 3c :BL(DE3)表达系统的表达水平的途径。方法 :根据大肠杆菌对密码的偏爱性 ,合成编码 5 3个氨基酸的hEGF基因 ,分别以非融合蛋白和融合蛋白两种方式表达。计算机分析两者mRNA的翻译起始区 (translationinitiationregion ,TIR)的结构。结果 :融合蛋白表达产量为 2 7%,非融合蛋白的表达用SDS -PAGE检测不到 ,两者均具有促细胞增殖的活性。融合蛋白mRNA的TIR的ΔG值较非融合蛋白的高。结论 :在pET - 3c :BL2 1(DE3)大肠杆菌表达系统中 ,以融合蛋白方式表达人表皮生长因子 ,表达效率高且不影响其活性。此外 ,mRNA的TIR的结构可能是影响外源基因在本研究的表达系统的表达效率的一个重要因素。
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