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目的建立高效液相色谱（HPLC）法同时测定贯叶金丝桃及相关药品中金丝桃苷、金丝桃素含量的方法。方法采用Hypersil GOLDTMC18 LC色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液（pH 2.30～2.32）-乙酸铵缓冲液(0.15 mol·L-1,pH 4.10～4.14),梯度洗脱（0～11 min,乙腈25%-0.05%磷酸水溶液75%;11～18 min,乙腈90%-乙酸铵缓冲液10%;18～22 min,乙腈25%-0.05%磷酸水溶液75%）;流速1.0 mL·min-1;检测波长360 nm和590 nm;柱温25℃;进样量10μL。按外标法定量分析。结果金丝桃苷和金丝桃素分别在0.860 0～4.300 0、0.018 8～0.150 0μg范围内与峰面积呈良好线性关系（r≥0.999 6）;其精密性、重复性、稳定性的相对标准偏差（RSD）均小于2%;平均加标回收率分别为98.33%（n=6）和99.20%（n=6）。结论该法快速、准确、分离度高,可用于贯叶金丝桃及相关药品中金丝桃苷和金丝桃素的含量测定。