【摘 要】
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目的 分析重楼皂苷Ⅶ对白细胞介素(IL)-1β 诱导的关节软骨细胞凋亡和炎症介质分泌的影响及机制.方法 人关节软骨细胞分成对照组、IL-1β 组(IL-1β 处理)、重楼皂苷Ⅶ低剂量组(IL-1β 和0.1μmol/L重楼皂苷Ⅶ处理)、重楼皂苷Ⅶ中剂量组(IL-1β和0.2μmol/L重楼皂苷Ⅶ处理)、重楼皂苷Ⅶ高剂量组(IL-1β和0.4μmol/L重楼皂苷Ⅶ处理)、重楼皂苷Ⅶ高剂量+LiCl组(IL-1β、Wnt/β-catenin信号激活剂LiCl、0.4μmol/L重楼皂苷Ⅶ处理),Western
【机 构】
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青岛市中医医院(青岛市海慈医院) 药剂科,山东 青岛 266011;青岛市中医医院(青岛市海慈医院) 血管外科,山东 青岛 266011;青岛市中医医院(青岛市海慈医院) 内分泌科,山东 青岛 266
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目的 分析重楼皂苷Ⅶ对白细胞介素(IL)-1β 诱导的关节软骨细胞凋亡和炎症介质分泌的影响及机制.方法 人关节软骨细胞分成对照组、IL-1β 组(IL-1β 处理)、重楼皂苷Ⅶ低剂量组(IL-1β 和0.1μmol/L重楼皂苷Ⅶ处理)、重楼皂苷Ⅶ中剂量组(IL-1β和0.2μmol/L重楼皂苷Ⅶ处理)、重楼皂苷Ⅶ高剂量组(IL-1β和0.4μmol/L重楼皂苷Ⅶ处理)、重楼皂苷Ⅶ高剂量+LiCl组(IL-1β、Wnt/β-catenin信号激活剂LiCl、0.4μmol/L重楼皂苷Ⅶ处理),Western印迹检测β-连环蛋白(β-catenin)、c-myc、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、剪切的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(酶切Caspase)-3蛋白表达,CCK-8实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞分泌IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-8,微量法检测一氧化氮(NO)含量.结果 与对照组比,IL-1β 组关节软骨细胞中 β-catenin、c-myc、iNOS蛋白表达量升高,细胞存活率降低,凋亡率和酶切Caspase-3蛋白表达量升高,细胞分泌的IL-6、TNF-α、IL-8、NO含量升高,差异有统计学意义(P<0.05);与IL-1β组比较,重楼皂苷Ⅶ低剂量组、中剂量组、高剂量组关节软骨细胞中β-catenin、c-myc、iNOS蛋白表达量逐渐降低,细胞存活率逐渐升高,凋亡率和酶切Caspase-3蛋白表达量逐渐降低,细胞分泌的IL-6、TNF-α、IL-8、NO含量逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05);与重楼皂苷Ⅶ高剂量组比较,重楼皂苷Ⅶ高剂量+LiCl组关节软骨细胞中β-catenin、c-myc、iNOS蛋白表达量升高,细胞存活率降低,凋亡率和酶切Caspase-3蛋白表达量升高,细胞分泌的IL-6、TNF-α、IL-8、NO含量升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 重楼皂苷Ⅶ抑制Wnt/β-catenin信号减少IL-1β诱导的关节软骨细胞凋亡和炎症介质分泌.
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