人脂联素基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

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目的:克隆人脂联素(adiponectin)基因,并在大肠杆菌宿主系统中高效表达出adiponectin蛋白进行鉴定。方法:从人皮下脂肪组织提取总RNA,确认其正确性后经RT-PCR扩增得到全长cDNA片段,此片段经纯化回收后克隆至pMD 18-T载体,经行DNA序列分析,进一步克隆构建到表达载体至pET-DEST42中,用IPTG在大肠杆菌中诱导表达。结果:含重组adiponeetin质粒的大肠杆菌经0.4mmol/L的IPTG诱导6h后有高表达。结论:adiponeetin基因的克隆构建和在大肠杆菌中
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