猪带绦虫TSO18基因真核表达载体的构建及其表达

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【摘要】

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采用PCR从重组克隆载体pGEM—TSO18中扩增出猪带绦虫六钩蚴TSO18基因，与毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9k相连接，构建重组表达载体pPIC9k—TSO18，转化大肠埃希氏菌JM109，经测序证实，

【作者】

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袁改玲才学鹏景志忠郑亚东骆学农郭爱疆

【机构】

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中国农业科学院兰州兽医研究所

【出处】

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中国兽医科技

【发表日期】

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2005年7期

【关键词】

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猪带绦虫 TSO18基因毕赤酵母诱导表达 Taenia solium TSO18 gene Pichia pastoris induction exp

【基金项目】

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国家重点基础研究发展规划(973)项目(G1999011906)

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采用PCR从重组克隆载体pGEM—TSO18中扩增出猪带绦虫六钩蚴TSO18基因，与毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9k相连接，构建重组表达载体pPIC9k—TSO18，转化大肠埃希氏菌JM109，经测序证实，基因序列完全正确。制备重组质粒pPIC9k—TSO18，用SalⅠ线性化，并电转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115，使重组表达载体与酵母染色体发生同源整合。采用G418抗性梯度法筛选得到高拷贝重组菌株，以甲醇进行诱导表达，SDS—PAGE和Western-blotting分析结果表

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