【摘 要】
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由于缺乏对照品,中药中三萜皂苷类成分的含量通常以比色法测定总皂苷含量来表征。但是,比色法专属性差,测定结果不够准确。因此,该文以木通皂苷为例探讨总三萜皂苷含量测定方
【机 构】
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中国中医科学院中药研究所中药质量控制技术国家工程实验室;
【基金项目】
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国家“重大新药创制”科技重大专项(2018ZX09721004)
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由于缺乏对照品,中药中三萜皂苷类成分的含量通常以比色法测定总皂苷含量来表征。但是,比色法专属性差,测定结果不够准确。因此,该文以木通皂苷为例探讨总三萜皂苷含量测定方法。采用HPLC测定木通药材酸水解产物中3种主要皂苷元阿江榄仁酸、常春藤皂苷元和齐墩果酸的含量。参考2015年版《中国药典》中银杏叶总黄酮醇苷的测定思路,以上述3种皂苷元含量之和乘以转换系数作为木通总三萜皂苷含量。LC-MS/MS分析结果显示mutongsaponin C和saponin PJI是木通中含有的2个最主要的三萜皂苷类化合物,且二者相对分子质量相同。因此,mutongsaponin C的相对分子质量与阿江榄仁酸、常春藤皂苷元和齐墩果酸相对分子质量的比值的均值被定义为转换系数。HPLC方法中采用ACE Excel 3 C18-AR色谱柱(4. 6 mm×150 mm,3μm)进行分离,甲醇-水(含有0. 04%冰醋酸和0. 02%三乙胺)为流动相,梯度洗脱,检测波长210 nm,流速0. 5 m L·min-1。结果显示阿江榄仁酸、齐墩果酸和常春藤皂苷元分别在1. 053~16. 84,0. 200~3. 200,1. 515~24. 24μg线性关系良好,平均加样回收率分别为97. 90%,97. 50%,100. 5%,RSD为2. 0%,2. 9%,2. 9%。方法学考察结果均符合含量测定要求。mutongsaponin C对3种皂苷元的转换系数的均值为2. 31。该方法简便,可靠,可用于木通药材中总三萜皂苷的含量测定,该思路可用于其他中药中总三萜皂苷的测定。
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