【摘 要】
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目的 探讨海马神经元癫(癎)模型转染微小RNA(miRNA)-212对脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶B(TrkB)信号转导通路的影响.方法 经体外培养7d的大鼠海马神经元(正常对照
【机 构】
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300052,天津医科大学总医院神经内科300070,天津医科大学;300280,天津海滨人民医院神经内科;300052,天津医科大学总医院保健医疗部;
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目的 探讨海马神经元癫(癎)模型转染微小RNA(miRNA)-212对脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶B(TrkB)信号转导通路的影响.方法 经体外培养7d的大鼠海马神经元(正常对照组),通过无镁离子细胞外液处理(3 h)方法建立癫(癎)神经元模型(癫(癎)模型组),继而以含镁离子正常细胞外液与慢病毒稀释液转染构建miRNA-212慢病毒表达载体;免疫荧光双染法、膜片钳技术和免疫印迹法观察转染miRNA-212对BDNF/TrkB信号转导通路的影响.结果 无论是正常海马神经元或癫痴神经元模型,与BDNF共培养后其磷酸化TrkB (pTrkB)/TrkB比值均显著升高(P=0.001),表明BDNF/TrkB信号转导通路被激活;转染miRNA-212后,癫(癎)神经元模型pTrkB/TrkB比值降低并低于未转染者(P=0.001),提示BDNF/TrkB信号转导通路受到抑制.结论 BDNF具有激活海马神经元BDNF/TrkB信号转导通路作用,而转染miRNA-212可抑制BDNF/TrkB信号转导通路.
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