【摘 要】
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目的:探讨仑伐替尼对甲状腺癌TPC-1细胞生物学行为的影响.方法:TPC-1细胞分为阴性对照组(不处理)与仑伐替尼组(20μmol/L仑伐替尼处理),采用克隆形成实验和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞克隆和凋亡情况;TPC-1细胞分为阴性对照组(不处理)与仑伐替尼组(40μmol/L仑伐替尼处理),应用Transwell小室检测细胞转移和侵袭情况;TPC-1细胞分为阴性对照组(不处理)与20、40μmol/L仑伐替尼组,应用Western blot法检测细胞Cleaved Caspase-
【机 构】
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郑州大学第一附属医院药学部 郑州450052;郑州大学第一附属医院肝胆胰外科 郑州450052;郑州大学第一附属医院内分泌科 郑州450052
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目的:探讨仑伐替尼对甲状腺癌TPC-1细胞生物学行为的影响.方法:TPC-1细胞分为阴性对照组(不处理)与仑伐替尼组(20μmol/L仑伐替尼处理),采用克隆形成实验和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞克隆和凋亡情况;TPC-1细胞分为阴性对照组(不处理)与仑伐替尼组(40μmol/L仑伐替尼处理),应用Transwell小室检测细胞转移和侵袭情况;TPC-1细胞分为阴性对照组(不处理)与20、40μmol/L仑伐替尼组,应用Western blot法检测细胞Cleaved Caspase-9、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)、LC3Ⅱ、LC3Ⅰ、P62蛋白表达;TPC-1细胞分为阴性对照组(不处理)、仑伐替尼组(20μmol/L仑伐替尼处理)、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(5 mmol/L 3-MA处理)、仑伐替尼+3-MA组,采用Western blot法检测LC3Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白的表达,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况.10只裸鼠于右侧腋下接种约1×107个TPC-1细胞建立移植瘤模型,待肿瘤生长至平均体积100 mm3时分为对照组(胃内灌注PBS)和仑伐替尼组[胃内灌注仑伐替尼25 mg/(kg·d)],比较3周后瘤体体积和质量.结果:与阴性对照组比较,仑伐替尼组细胞克隆数减少、凋亡率增加、侵袭和转移能力减弱;仑伐替尼组TPC-1细胞Cleaved Caspase-9蛋白表达水平和LC3Ⅱ/LC 3Ⅰ比值升高,MMP-2、p-AKT、P62蛋白表达水平降低(P<0.05).仑伐替尼联合3-MA增强TPC-1细胞的生长抑制和凋亡(P<0.05).仑伐替尼组裸鼠移植瘤体积及质量较对照组降低(P<0.05).结论:仑伐替尼抑制TPC-1细胞生长及转移、诱导凋亡及自噬,可能与p-AKT/Cleaved Caspase-9/MMP-2通路有关.
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