利用基因捕获技术建立稳定表达HBV的细胞模型

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hj11254

【摘要】

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pGEM-HBV1．3质粒经HindⅢ限制性内切酶消化，将HBV1．3全长DNA切下，与同样经HindⅢ限制性内切酶降解过的PU21连接，得到PU21-HBV重组质粒。将该重组质粒采用电击转染方法导入HepG2细

【作者】

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何云燕谭畅李毅黄爱龙汤华

【机构】

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重庆医科大学感染性疾病分子生物学重点实验室

【出处】

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中国生物工程杂志

【发表日期】

：

2007年2期

【关键词】

：

PU21基因捕获载体乙型肝炎病毒(HBV) 表达 PU21 gene trapping vector HBV Expression

【基金项目】

：

重庆市教委科学技术研究项目（KJ060301）

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pGEM-HBV1．3质粒经HindⅢ限制性内切酶消化，将HBV1．3全长DNA切下，与同样经HindⅢ限制性内切酶降解过的PU21连接，得到PU21-HBV重组质粒。将该重组质粒采用电击转染方法导入HepG2细胞中，G418筛选阳性克隆并以X—gal染色，RT—PCR、Southeern blot等方法验证HBVDNA的插入和表达。Pu21-HBV重组质粒经测序证明HBV1．3全长DNA正确与PU21载体连接，该重组质粒转染HepG2细胞后经G418筛选，得到一系列阳性克隆，Southern blot证

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