基于电喷雾电离-捕集离子迁移谱-飞行时间质谱检测血红蛋白在不同pH值和醇溶液下的构象变化

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蛋白质是重要的生物分子之一,具有很多重要的生物功能.大量的研究表明,蛋白质分子的功能与其分子结构和构象有关,因此,研究蛋白质分子的结构和变化是了解其生物功能和作用过程的主要途径之一.本研究利用质谱和离子迁移谱技术,研究了血红蛋白在不同酸碱度、不同浓度的醇溶液下构象变化情况.实验结果表明,血红蛋白在pH=4时会发生明显的结构改变,并观察到血红素脱落的现象.随着pH值降低,其离子迁移率进一步增大,说明随着溶液酸度逐渐增加,蛋白质解折叠的程度越来越大.通过观察离子迁移率的变化,推测了血红蛋白在不同pH值下的折叠情况,并研究了相同pH值条件下,携带不同电荷的血红蛋白离子的折叠情况,结果表明,所带电荷越多,其解折叠程度越大.此外,通过考察血红蛋白在不同浓度的醇溶液中血红素脱落的情况和离子迁移率,发现不同种类的醇对血红蛋白折叠状态的影响程度不同,如50%(V/V)甲醇溶液可导致血红蛋白折叠状态明显改变,但40%(V/V)乙醇溶液可导致几乎相同的结构变化.在高比例乙醇溶液中,血红蛋白分子会发生结构坍塌现象,使得血红蛋白在高比例醇溶液中的结构更加紧凑.
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