马立克氏病病毒gB基因的重组痘苗质粒构建

来源 :河南农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：op0034

【摘要】

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根据马立克氏病病毒（ＭＤＶ）ｇＢ基因序列设计ＰＣＲ引物，以ｇＢ质粒为模板，扩增出ＭＤＶｇＢ基因５’端到３’端３８８ｂｐ的ＤＮＡ片段。用ＥｃｏＲⅠ和ＸｂａⅠ双酶消化ＰＣＲ产物，将其克隆入ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ质粒，构建中间质粒Ⅰ；用ＸｂａⅠ消化ｇＢ质粒，切出ＭＤＶｇＢ基因ＸｂａⅠ片段，并正向克隆入

【作者】

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杨霞毛春生

【机构】

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河南农业大学牧医工程学院

【出处】

：

河南农业大学学报

【发表日期】

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1999年1期

【关键词】

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马立克氏病毒 GB基因重组痘苗质粒构建 Mareks disease virus gB gene recombiant uaccinia plasmid

【基金项目】

：

国家自然科学基金

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根据马立克氏病病毒（ＭＤＶ）ｇＢ基因序列设计ＰＣＲ引物，以ｇＢ质粒为模板，扩增出ＭＤＶｇＢ基因５’端到３’端３８８ｂｐ的ＤＮＡ片段。用ＥｃｏＲⅠ和ＸｂａⅠ双酶消化ＰＣＲ产物，将其克隆入ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ质粒，构建中间质粒Ⅰ；用ＸｂａⅠ消化ｇＢ质粒，切出ＭＤＶｇＢ基因ＸｂａⅠ片段，并正向克隆入中间质粒Ⅰ的ＸｂａⅠ位点，将ＭＤＶｇＢ基因１３７ｂｐ的ＰＣＲ产物与其ＸｂａⅠ片段正向连接，构建中间质粒Ⅱ用ＥｃｏＲⅠ调出中间质粒Ⅱ中的ＭＤＶｇＢ基因，正向克隆入痘苗病毒表达载体ｐ１６启动子下游，构建ＭＤＶｇＢ基因

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