【摘 要】
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目的 研究两种新型培养基-内皮细胞培养基(ECM)和无动物成分培养基(ACF)在无血清器官培养法保存角膜内皮细胞活性方面的效果。方法 将64枚兔角膜平均分为4份,分别密闭保存于E
【机 构】
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第二军医大学济南临床医学院济南军区总医院眼科
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目的 研究两种新型培养基-内皮细胞培养基(ECM)和无动物成分培养基(ACF)在无血清器官培养法保存角膜内皮细胞活性方面的效果。方法 将64枚兔角膜平均分为4份,分别密闭保存于ECM+ 2％胎牛血清(FBS)、ECM和ACF等4种不同的培养基中4周,再以葡聚糖T500脱水2d。伊格尔最低基础培养基(MEM)作对照组。检测保存前后角膜内皮细胞密度、角膜厚度、内皮层中肌动蛋白微丝(F-actin)的表达和透射电镜下内皮细胞超微结构的变化。结果 保存结束后,ECM+ 2％ FBS组的兔角膜内皮细胞密度最高(2123±240)个/mm2,ECM和ACF组结果与其接近,内皮细胞死亡率也较低,对照组内皮细胞密度最低( 1732±144)个/mm2,3个实验组与对照组间差异有统计学意义(F=23.180,P=0.000)。免疫组织化学染色显示F-actin在兔角膜内皮层成功表达。WB半定量检测表明F-actin蛋白在各组角膜内皮层的表达趋势与内皮细胞密度计数结果一致,3个实验组与对照组间差异有统计学意义(F= 159.876,P=0.000)。3个实验组内皮细胞的超微结构与正常角膜区别较小。结论 在器官培养法保存过程中,无血清的ECM和ACF培养基可以较传统MEM培养基更好地保持角膜内皮细胞的活性和屏障功能,在无血清器官培养保存角膜方面具有应用前景。
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