【摘 要】
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目的 制备重组Taq DNA聚合酶，为PCR提供试剂。方法 用Taq DNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E．coli菌株，异丙基硫代-β—D-半乳糖苷（IPTG）诱导12h表达Taq DNA聚合酶，溶菌酶、NP40裂
【机 构】
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新乡医学院生物化学与分子生物学教研室,新乡医学院分子生物学研究室
【基金项目】
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河南省科技厅自然科学基金(编号:511042300);河南省科技攻关资助项目(编号:624410041)
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目的 制备重组Taq DNA聚合酶，为PCR提供试剂。方法 用Taq DNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E．coli菌株，异丙基硫代-β—D-半乳糖苷（IPTG）诱导12h表达Taq DNA聚合酶，溶菌酶、NP40裂解细菌，硫酸铵沉淀、4℃透析，SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和PCR扩增分析其纯度和活性。结果 分离纯化制备的Taq酶，纯度、活性都可与同类产品相比，能有效扩增DNA片段。结论 该方法制备可用于PCR的Taq酶具有快速简便的优点。
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