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目的 利用重组复制缺陷型腺病毒载体将外源非分泌型人尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)基因导入活化的肝星状细胞(HSC)内,研究uPA表达对HSC胶原沉积的影响.方法细菌内同源重组构建表达非分泌型uPA的复制缺陷型重组腺病毒AduPA.体外感染肝星状细胞株HSC-T6,Northern印迹法和免疫细胞化学法检测uPA在HSC中的表达.酶联免疫吸附实验测定培养上清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)分泌水平.免疫细胞荧光法测定外源uPA基因导入对HSC胞质内Ⅰ、Ⅲ型胶原含量变化的影响.结果同源重组最终获得约5×1011 efu/ml AduPA.AduPA体外感染HSC 3 d后,Northern印迹法和免疫细胞化学法显示uPA mRNA及蛋白表达明显增加,细胞上清液中MMP-2分泌水平达(274.45±7.63)pg/ml,明显高于对照组的(145.85±6.58)pg/ml(P＜0.01).免疫细胞荧光法提示uPA基因导入HSC后,胞质内Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显减少.结论通过重组腺病毒载体将外源uPA基因导入HSC内可维持uPA高效表达并上调MMP-2分泌水平,减少细胞外基质沉积,是基因治疗肝纤维化的有效方法。