【摘 要】
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目的本研究旨在探讨UHRF1调节晶状体上皮细胞抗氧化、抗凋亡的能力以及其潜在分子机制。方法应用实时定量PCR检测白内障体内体外模型中UHRF1的表达；将不同浓度的H2O2分别加入人晶状体上皮细胞中，通过CCK-8检测H2O2对于晶状体细胞的凋亡影响。通过活性氧试剂盒检测过表达UHRF1后，分析对于氧化应激诱导的HLEC-3细胞活性氧的影响。通过免疫蛋白印记方法检测氧化应激诱导的HLEC-3转染过表
【机 构】
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哈尔滨医科大学附属第四医院眼科 150001,哈尔滨市眼科医院眼科 150001
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目的本研究旨在探讨UHRF1调节晶状体上皮细胞抗氧化、抗凋亡的能力以及其潜在分子机制。
方法应用实时定量PCR检测白内障体内体外模型中UHRF1的表达；将不同浓度的H2O2分别加入人晶状体上皮细胞中，通过CCK-8检测H2O2对于晶状体细胞的凋亡影响。通过活性氧试剂盒检测过表达UHRF1后，分析对于氧化应激诱导的HLEC-3细胞活性氧的影响。通过免疫蛋白印记方法检测氧化应激诱导的HLEC-3转染过表达UHRF1后凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Rb和p16INK4A蛋白的变化，caspase-3活性试剂盒检测预转染UHRF1后由氧化应激(100 μmol/L，12 h)诱导HLEC-3细胞中Caspase-3活性变化。
结果白内障患者前囊膜以及体外模型中，UHRF1的表达有显著降低(P＝0.032)。过表达UHRF1后能够明显逆转由氧化应激诱导的HLEC-3细胞活性降低以及细胞内活性因子SOD以及GSH-Px降低，以及ROS与MDA表达升高。而过表达UHRF1 36 h后，H2O2(100 μmol/L)刺激12 h，蛋白印迹结果显示相对于正常对照组，UHRF1组中Bax、PCNA蛋白表达明显升高，而Bcl-2表达明显降低。Caspase-3活性相对于对照组，实验组也明显升高(P＝0.021)。此外，相对于对照组，Rb (P＝0.041)以及p16INK4A (P＝0.038)蛋白在过表达UHRF1组明显升高。
结论过表达UHRF1通过抑制ROS/Rb/p16INK4A通路逆转由氧化应激诱导的HLECs的细胞凋亡。UHRF1将来可能成为一种治疗白内障潜在治疗靶点。
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