施马伦贝格病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaowangdoc
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 建立施马伦贝格病毒逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)快速检测方法.方法 从GenBank数据库中获得施马伦贝格病毒S基因序列,应用DNAStar软件MegAlign程序分析其序列,利用PrimerExplorerV4软件在序列保守区域设计LAMP引物,即外引物、内引物,建立施马伦贝格病毒等温扩增快速检测方法.结果 RT-LAMP检测方法对施马伦贝格病毒RNA的灵敏度达到10个拷贝,所用引物对赤羽病毒、口蹄疫病毒、蓝舌病毒、水泡性口炎病毒及牛病毒性腹泻病毒无特异性扩增,表现出良好特异性.结论 建立的施马伦贝格病毒等温扩增快速检测方法灵敏度高、特异性强,为快速检测施马伦贝格病毒提供了新方法。

其他文献
目的 探讨慢性丙型肝炎(CHC)患者体内氧化损伤的情况.方法 52例CHC患者,按丙氨酸转氨酶(ALT)水平分为A组(ALT上升组)和B组(ALT正常组).正常对照组为20例健康志愿者.利用酶联免疫吸附法(ELISA)测定研究对象血清黄嘌呤氧化酶(XOD),丙二醛(MDA),氧化型谷胱甘肽(GSSG),谷胱甘肽(GSH),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),谷胱甘肽巯基转移酶(GST),谷胱甘肽还
目的 分析女性HPV感染的阳性率和各年龄段的关系及常见亚型的分布情况,探讨女性HPV DNA基因分型技术检测在宫颈癌防治方面的应用价值.方法 采用HPV基因分型技术对1448例妇科门诊就诊者进行HPV分型检测.结果 1448例样本中,检出HPV阳性者531例,总阳性率为36.7%,其中高危型HPV468例,占感染率88%,低危型HPV63例,占感染率12%,混合感染HPV122例,占感染率23%,
目的 研究感染羊瘙痒因子139A的小鼠脑组织中自噬的活化及其机制。方法采用WesternBlot方法检测感染羊瘙痒因子139A的小鼠终末期脑组织匀浆中的AMPK、ULKl及其磷酸化水平和LC3II的表达,并对其进行定量分析。结果感染139A毒株的小鼠脑组织终末期脑组织中AMPK、ULKl及其磷酸化水平均表达升高。同时发现LC3II水平增加。结论AMPK-ULKl通路在139A感染的小鼠脑组织中活化
期刊
目的 探讨重组人β防御素3(human beta-defensin-3,hBD-3)对BEAS-2B细胞白介素17A(IL-17A)和白介素22 (IL-22)表达的影响.方法 用不同浓度重组hBD-3分别刺激BEAS-2B细胞6h和24 h,采用荧光定量PCR检测BEAS-2B细胞中Toll样受体2(TLR2)、IL-17A和IL-22 mRNA表达水平;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测样本的
目的 研究铝佐剂和免疫程序对不同配比的Sabin IPV免疫原性的影响.方法 用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒原液制备四批Sabin IPV,分别为中剂量无佐剂组、中剂量铝佐剂组、低剂量无佐剂组、低剂量铝佐剂组,采用0、1、2月和0、2、4月两种免疫程序对大鼠进行3针基础免疫,每针基础免疫一个月后采血,并检测免疫后血清中3个型别的中和抗体水平.结果 经过3针基础免疫后,各组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中和抗体几何平均滴
目的 设计一对引物并利用该引物建立同时检测、区分诺如病毒GI型和GⅡ型的RT.PCR检测方法。方法参照已发表的GI型和GⅡ型诺如病毒全基因组序列,针对其衣壳蛋白基因保守区设计一对引物,提取病毒的RNA,进行RT-PCR扩增,对该方法的特异性及敏感性进行评价,并对临床粪便标本进行检测。结果实验结果表明,该检测方法特异性强,对GI型、GⅡ型诺如病毒、轮状病毒、肠道腺病毒、甲型肝炎病毒进行检测,均无交叉
期刊
目的 了解派罗欣对ALT低水平但肝组织炎症活动度≥G2的慢性乙型肝炎患者的疗效.方法 随机选择52例ALT低水平(ALT <2×ULN)但肝组织炎症活动度≥G2的慢性乙型肝炎患者为观察组,55例ALT>2 ×ULN的慢性乙型肝炎患者为对照组,分别接受派罗欣治疗48周,并对两组患者的疗效进行比较.计量资料采用t检验,计数资料采用x2检验.结果 观察组HBV DNA下降值(log10拷贝/ml)在治疗
目的 调查病毒性肝炎后肝硬化住院患者的感染率和感染源,评估感染的危险因素.方法 采用横断面研究,连续收集382例病毒性肝炎后肝硬化住院患者,查阅患者相关临床资料,采用单因素分析、逻辑回归分析等方法分析患者感染相关因素和独立危险因素,微生物培养和鉴定分析感染源.结果 通过调查统计肝硬化住院患者感染率20.2%,77名患者感染,最常见感染是自发性细菌性腹膜炎(27例),感染显著增加患者的死亡(22.1
目的 分析深圳地区慢性乙型肝炎患者核苷(酸)类似物耐药基因突变特征,为临床合理用药提供科学依据.方法 采用MALDI-TOF-MS技术对2465例慢性乙型肝炎患者HBV耐药相关基因突变进行检测,分析HBV耐药相关基因突变特征及其临床意义.结果 在2465例慢性乙型肝炎患者中,共检测到763例发生碱基突变,其中拉米夫定耐药突变相关位点频率最高,约42.96%,其中突变位点主要为rtL180M(14.
目的 探讨珠海市冬春季节儿童诺如病毒(NV)、扎如病毒(SV)和星状病毒(AstV)等3种重要病毒性腹泻的流行病学特征.方法 采集2009年11月21日至2010年4月3日在珠海市妇幼保健院就诊的腹泻儿童粪便样本,选取轮状病毒和腺病毒筛查阴性的样本,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测NV、SV和AstV的特异基因片段,并对诺如病毒检测阳性的样本进行分子分型.结果 3种病毒季节总检出率