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研究转录因子CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)在慢性髓性白血病(CML)患者中的表达情况及其作用机制。
方法收集50例CML患者(慢性期33例,加速期7例,急变期10例)骨髓标本和20名正常对照者外周血标本,用RT-PCR方法检测C/EBPα基因mRNA的表达情况及其与bcr-abl融合基因的相关性;观察伊马替尼对K562细胞C/EBPα基因mRNA表达的影响;采用慢病毒转染的方法将重组pLVX-C/EBPα-3FLAG-Puro及空载体pLVX-EGFP-3FLAG-Puro慢病毒质粒转入K562细胞,构建稳定表达C/EBPα的K562细胞株;用CCK-8试剂盒检测细胞增殖;RT-PCR方法检测Foxo3a、Bim基因的表达情况。
结果与正常对照者相比,CML患者C/EBPα mRNA表达显著下降(P<0.01),并与bcr-abl融合基因表达呈负相关(r=-0.505,P<0.01);RT-PCR和Western blot检测结果显示成功构建稳定表达C/EBPα的K562细胞株;K562-C/EBPα细胞增殖水平明显低于未处理K562细胞及K562-空载体细胞;K562-C/EBPα细胞Foxo3a、Bim基因mRNA相对表达量分别为1.06±0.06、0.53±0.07,均高于K562-空载体和K562细胞(P<0.01,P<0.05)。
结论CML患者转录因子C/EBPα表达水平下调,过表达C/EBPα对K562细胞增殖有抑制作用。