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目的
由ACHN人肾癌细胞系中分离肿瘤干细胞样细胞,并鉴定其干细胞相关特性,为进一步研究应用奠定基础。
方法采用无血清培养法富集ACHN细胞球,应用MTT法绘制其生长曲线,利用流式细胞仪观察细胞周期,分析细胞表面分子标志物CD133、CD44的表达,利用RT-PCR法分析Oct3/4、Bmi、Nanog、β-catenin干性相关基因的表达,并观察其裸鼠体内成瘤能力。
结果ACHN细胞经无血清培养可形成悬浮细胞球,其与ACHN细胞相比,具有更强的体外增殖能力,高表达细胞表面分子标志物CD44,并高表达Oct3/4、Bmi、Nanog、β-catenin等干性相关基因,而且裸鼠体内成瘤能力更强。
结论肾细胞癌中存在肿瘤干细胞样细胞,通过无血清培养法可以有效、简便地富集ACHN人肾癌细胞系肿瘤干细胞样细胞,为以肾癌干细胞为靶点的靶向治疗研究奠定了一定基础。