【摘 要】
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目的 构建含血管内皮生长因子(VEGF)基因的慢病毒载体,转染人胚胎来源的胰岛干细胞(hPSC),探讨VEGF在胰岛干细胞中的体外表达水平及其影响因素.方法 将VEGF基因克隆入慢病毒载体,利用293T细胞包装出病毒,按拷贝数分别为2、5、10转染胰岛干细胞,测定不同转染组VEGF的分泌水平.结果 含VEGF的病毒上清可以在体外培养条件下成功转染胰岛干细胞,经潮霉素筛选3 d后,对照组及拷贝数分别
【机 构】
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100016,北京,清华大学第一附属医院泌尿中心,100016,北京,清华大学第一附属医院泌尿中心,北京老年病医疗研究中心,100016,北京,清华大学第一附属医院泌尿中心,100016,北京,清华大
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目的 构建含血管内皮生长因子(VEGF)基因的慢病毒载体,转染人胚胎来源的胰岛干细胞(hPSC),探讨VEGF在胰岛干细胞中的体外表达水平及其影响因素.方法 将VEGF基因克隆入慢病毒载体,利用293T细胞包装出病毒,按拷贝数分别为2、5、10转染胰岛干细胞,测定不同转染组VEGF的分泌水平.结果 含VEGF的病毒上清可以在体外培养条件下成功转染胰岛干细胞,经潮霉素筛选3 d后,对照组及拷贝数分别为2、5、10的转染组每1×106个细胞每小时VEGF的分泌量分别为(60.3±13.4)、(1622.0±302.0)、(2270.0±340.0)、(3090.0±465.0)ng/L.对照组与转染组间(P＜0.05)以及各转染组之间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 含VEGF的慢病毒载体可以成功转染人胚胎来源的胰岛干细胞,使其持续高表达VEGF,通过改变转染拷贝数可在一定水平上控制VEGF的分泌水平。
其他文献
目的 应用比较蛋白质组学方法探讨人动脉粥样硬化闭塞症(ASO)差异蛋白质的表达及其在ASO发病机制中的作用.方法选取ASO股动脉8例及正常股动脉5例,提取组织蛋白质,行双向凝胶电泳分离、质谱分析及数据库查询,获得差异蛋白信息.结果 成功建立ASO和正常股动脉双向电泳图谱,含量相差大于2倍以上的蛋白质53个,27个上调,26个下调,质谱鉴定出13种蛋白质,主要与炎症、免疫、氧化应激、脂质代谢等相关.
肝星状细胞（HSCs）又称贮脂细胞。HSCs活化并导致细胞外基质过量沉积，是肝纤维化发生的中心环节。本研究旨在利用Optiprep分离HSCs时形成的合理密度梯度，建立稳定、简便的大鼠HSCs分离法。
本研究旨在建立自体脂肪干细胞移植治疗心肌梗死动物模型. 一、对象与方法 1.材料:清洁级spreague-dawley (SD)大鼠90只,雌雄不限,体质量(113±20)g,由我院实验动物中心提供.随机分为假手术腹股沟组、假手术肩胛骨脂肪组、腹股沟组和肩胛骨组。
目的 观察三七总皂苷（PNS）对大鼠移植静脉再狭窄的影响。方法建立SD大鼠颈外静脉颈总动脉旁路移植模型，随机分为假手术组、模型组和PNS组，造模后第2天开始灌胃给药，PNS组给予PNS（100mg／kg），假手术组、模型组灌胃等量蒸馏水（10ml／kg）。给药14d后，取静脉血管桥固定，观察血管内膜增生，免疫组织化学测定增殖细胞核抗原（PCNA）表达及TUNEL法检测平滑肌细胞凋亡。结果上述3组的
目的 比较正常前列腺外周带来源原代基质细胞(NPPF),移行带来源原代基质细胞(NPTF)及前列腺癌组织来源原代基质细胞(CAF)的生物学特性差异,以及它们对前列腺癌细胞株C4-2B的不同影响.方法 苏木素-伊红(HE)染色鉴定前列腺不同区带及癌组织的组织学特征差异;原代培养NPPF、NPTF、CAF,免疫细胞化学染色观察其波形蛋白(Vimentin)、平滑肌动蛋白(SMA)及前列腺特异性抗原(P
乳腺癌是全球妇女最常见的恶性肿瘤之一，发病率攀升，且呈年轻化态势，为妇女恶性肿瘤死因的首位，倍受世界各国瞩目。据资料统计，约1％～5％乳腺癌患者在就诊时已发现转移性病变，另外，在治疗后20％～30％的病例也会发生远处转移。远处转移可发生在临床各病期，由于呈隐匿状态，难以用常规方法检出，因此是造成治疗失败或死亡的主要原因。
目的 观察蜂毒肽(melittin)对大鼠前列腺炎疼痛模型的治疗作用.方法 通过手术将弗氏完全佐剂(CFA)注射到SD大鼠前列腺中建立模型,继续饲养12 d后再次通过手术将蜂毒肽注射到大鼠前列腺内进行干预.在注射CFA后的第6、12、18天进行机械痛阈测定,然后取前列腺和脊髓标本分别进行组织学、环氧合酶-2(COX-2)以及脊髓背角胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的测定.对照组大鼠,前列腺内注射等量
近年来,趋化因子受体在肿瘤转移中的作用得到广泛关注,基质细胞衍生因子-1(SDF-1)与其特异性受体趋化因子受体4(CXCR4)构成的生物学轴激活的特殊信号传导途径,对癌细胞在转移好发部位种植、存活和增殖起关键的作用[1].因此,CXCR4可能是人类肿瘤治疗的一个潜在的靶位。
目的 探讨肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达及其意义.方法 应用免疫组织化学方法(SP法)检测76例HCC患者肿瘤组织和癌旁组织中TNFR1的蛋白表达,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测其mRNA表达水平.结果 TNFR1在HCC中表达阳性率(39.5%),显著低于癌旁组织(89.5%,P＜0.05),并且随着肿瘤分级的增加,TNFR1在癌旁组织中表达量也
人工膝关节置换术（TKA）后深静脉血栓形成（DVT）是常见并发症，致命性肺栓塞（PE）是术后早期主要死亡原因。DVT预防已达成共识，争议主要在于药物选择、用药时机和时间、监测筛查等，理想方案需兼顾有效性和安全性。我们以PE为研究终点，探讨利伐沙班、低分子肝素（LMWH）、脉络舒通分别联合物理预防存防治院内DVT有效性和安全性上的差异，以期为DVT防治提供更多选择。