应用酵母双杂交技术筛选白细胞cDNA文库与NS5ATP1结合蛋白基因

来源 :世界华人消化杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:helpothers
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目的:用酵母双杂交技术筛选白细胞中与NSA5TP1结合蛋白的编码基因。方法:用多聚酶链反应(PCR)法扩增NS5NTP1基因,连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人白细胞文库质粒的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基上进行双重筛选阳性菌落,增菌后提出质粒,转化入大肠杆菌(DH5α),提出质粒并测序,进行生物信息学分析.结果:成功克隆出NS5ATP1基因并在酵母细胞中表达,配合后选出在四缺(SD/-Trp-Leu-Ade-His)对培养基及
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