目的了解肠杆菌科细菌临床分布特征与耐药性变迁,为临床抗肠杆菌科细菌感染提供实验数据。方法收集遵义医学院附属医院2014年~2016年从各标本分离的感染菌株,利用VITEK MS质谱仪和全自动微生物鉴定及药敏分析仪进行鉴定与药敏实验。使用WHONET5.6软件对结果进行分析比较。结果 2014~2016年共分离肠杆菌科细菌7 110株,前3位菌属均为埃希菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属。主要标本来源是尿液所占比例达27%以上,其次是痰液及血液。2014~2016年产超广谱β-内酰胺酶(Extended Spectrum Beta-Lactamases,ESBLs)大肠埃希菌分别占大肠埃希菌58.1%、61.2%、63.3%,产ESBLs肺炎克雷伯菌分别占肺炎克雷伯菌35.0%、33.1%、29.3%。在药敏分析中,肠杆菌科细菌对青霉素类药物耐药率高,耐药率均高于50%。前3种细菌对阿米卡星与亚胺培南保持着较高的敏感性,耐药率均低于5.0%。结论埃希菌属检出率逐年增加,而克雷伯菌属、肠杆菌属为逐年下降的趋势;产ESBLs大肠埃希菌逐年上升;3种细菌对阿米卡星、碳青霉烯类药物保持着较高的敏感性,但已出现耐药菌,应引起重视。加强对医院感染和对医院抗菌用药的控制,合理使用抗菌药物,降低肠杆菌科细菌耐药率。