游仆虫中心蛋白在大肠杆菌中的高效表达和多克隆抗体制备

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中心蛋白是一种在微管组织中心的复制和分离中起着重要作用的蛋白质.为了进一步进行中心蛋白结构和功能的研究,我们克隆了单细胞真核生物游仆虫中心蛋白基因并构建了重组表达质粒pGEX-6P-EoCen,其在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导后获得了大量的可溶性表达,融合蛋白表达水平达到了细菌总蛋白的32.6%.GST抗体进行Western blotting检测结果为阳性.经GST亲和层析和superdex 75凝胶层析后得到90%以上电泳纯的蛋白.用纯化后的蛋白免疫大鼠产生抗血清,经ELISA检测抗体效价达1:2
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