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目的
探讨核酸适配子AS1411对紫杉醇耐药肺腺癌A549细胞(A549/T细胞)凋亡的影响。
方法采用0~20.0 μmol/L浓度的AS1411处理A549/T细胞,甲基甲苯基硫细胞检测(MTS)实验、平板克隆形成实验检测细胞活性[吸光度值(A490 nm)]及增殖能力变化,流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响,同时应用蛋白免疫印迹法检测凋亡信号通路相关蛋白表达的变化。
结果A549/T细胞呈现部分上皮细胞间质化(EMT)、表皮生长因子受体(EGFR)表达缺失等特征。经5.0 μmol/L的AS1411处理后,与对照序列相比,A549/T细胞的细胞活性显著降低(A490 nm:0.185±0.009比0.272±0.006,P<0.001)、克隆形成数显著减少(74±13比120±12,P=0.010);随AS1411浓度的增加,细胞活性明显降低,呈剂量依赖性。用20.0 μmol/L的AS1411处理48 h后,A549/T细胞凋亡率显著高于对照序列[(19.9±2.6)%比(8.8±1.3)%,P=0.002],同时蛋白激酶B(AKT)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和B细胞淋巴瘤因子2(Bcl–2)表达均显著低于对照序列处理组(0.353±0.003、0.432±0.015、0.294±0.015比0.688±0.003、0.911±0.019、0.422±0.018,均P<0.001)。
结论AS1411可通过抑制AKT–ERK通路而促进A549/T细胞凋亡。