【摘 要】
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从酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CICC 1002基因组中克隆获得醛酮还原酶基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中实现过量表达.重组醛酮还原酶经Ni-NTA亲和层析分离纯化获得高纯度目的
【基金项目】
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浙江省新苗人才计划项目(2016R403074);浙江省自然科学基金资助项目(LY17B020012)
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从酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CICC 1002基因组中克隆获得醛酮还原酶基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中实现过量表达.重组醛酮还原酶经Ni-NTA亲和层析分离纯化获得高纯度目的蛋白,并对其进行酶学性质表征.该重组酶经SDS-PAGE检测为单一条带,分子量为38kDa.该酶的最适pH和最适温度分别为6.0,60℃,且具有良好的稳定性.1mmol/L金属离子Co~(2+)或Ni ~(2+)显著提高酶活力.底物特异性分析表明:该重组酶对邻位二酮具有较高活力,其中对酮基泛解
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