【摘 要】
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【目的】构建犬MC4R基因编码区的融合表达载体并在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白。【方法】以Beagle犬基因组DNA为模板，经PCR技术扩增目的片段，利用LPReccoPCR克隆技术将目的片段
【基金项目】
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辽宁省教育厅基金（202172052）.
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【目的】构建犬MC4R基因编码区的融合表达载体并在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白。【方法】以Beagle犬基因组DNA为模板，经PCR技术扩增目的片段，利用LPReccoPCR克隆技术将目的片段直接重组到原核表达载体pGEX-4T-1上，转化到EcoliDH5α，筛选阳性克隆。BamHI、XhoI酶切鉴定。DNA测序检测插入序列的正确性。将测序正确的重组表达质粒pGEX-4T-1-cMC4R转化到ECO—nBL21内，经IFFG诱导后。利用SDS—PAGE检测犬MC4R蛋白的表达。[结果]成功构建重组表达质粒
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