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为建立理想的体外生物人工肝支持系统(EBLSS),给肝衰竭患者提供新的治疗手段和措施,应用两步灌流技术分离人肝细胞,球形聚集法加以培养,同时使用中空纤维型生物反应器和血液透析仪改装的辅助循环系统,共同构成体外生物人工肝支持系统,并以正常犬为对象进行体外实验。结果显示,分离所得肝细胞成活率为94%,总产量达2×1010个以上,肝细胞在限制贴壁条件下形成球形聚集体悬浮生长,EBLSS在实验犬体外运行5小时后,肝细胞仍保持较高的活性。实验过程犬生命征平稳,血清总蛋白和白蛋白增加。上述结果表明,所建EBLSS已基本解决了生物人工肝的关键技术,系统安全、有效。为进一步开展肝衰竭的生物人工肝支持研究奠定了基础。