【摘 要】
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目的 探讨表皮生长因子(EGF)介导,经PI3 K/AKT信号通路调控小鼠卵巢颗粒细胞增殖的作用与机制.方法 取分离纯化的小鼠卵巢颗粒细胞,添加10ng ·mL-1的EGF对其培养24h后,然后
【机 构】
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宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室、宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室,银川,750004宁夏医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系,银川,750004;
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目的 探讨表皮生长因子(EGF)介导,经PI3 K/AKT信号通路调控小鼠卵巢颗粒细胞增殖的作用与机制.方法 取分离纯化的小鼠卵巢颗粒细胞,添加10ng ·mL-1的EGF对其培养24h后,然后再添加20μM浓度的P13K抑制剂LY294002处理细胞72h,利用CCK-8检测颗粒细胞增殖情况;应用Real-time PCR法检测AKT mRNA的表达;应用Western blot法检测体外培养小鼠颗粒细胞中总AKT(t-AKT)及磷酸化AKTThr308位点(p-AKTThr308)蛋白的表达情况.结果 (1) 10ng·mL-1的EGF对小鼠颗粒细胞增殖效应明显,能够显著提高AKT基因在颗粒细胞中的表达(P＜0.05),能显著性促进t-AKT及p-AKTThr308蛋白的表达(P＜0.05).(2) PI3K特异性抑制剂LY294002明显抑制EGF促进颗粒细胞增殖的效应(P＜0.05).结论 EGF能活化小鼠颗粒细胞的PI3K/AKT信号通路,促进颗粒细胞生长、增殖.
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