观察慢性酒精暴露后Wistar大鼠不同戒断时间点纹状体NMDA受体2B亚基(NMDA receptor 2B subunit,NR2B)表达的变化。
方法72只雄性Wistar大鼠,按照完全随机法分为戒断2 h组、戒断6 h组、戒断12 h组、戒断1 d组、戒断3 d组和正常对照组,每组12只。5个戒断组大鼠自由饮用体积百分比为6%的酒精水溶液16周,正常对照组饮用纯净水16周。戒断组分别于末次饮酒后2 h、6 h、12 h、1 d、3 d时,正常对照组于末次饮水后2 h时,评估戒断症状后处死取纹状体,采用免疫荧光法和Western blot检测各组大鼠纹状体NR2B蛋白含量的表达,采用实时荧光定量PCR技术检测各组大鼠纹状体NR2B mRNA的表达。
结果与正常对照组戒断评分[(1.50±0.80)分]相比,戒断2 h、6 h、12 h、1 d、3 d组大鼠戒断评分[(10.42±2.50)分、(15.42±1.93)分、(9.25±2.01)分、(7.67±1.92)分、(2.25±0.87)分]均增高,戒断6 h组评分最高;与正常对照组大鼠纹状体NR2B荧光表达强度[(2210.00±178.20)]、NR2B蛋白表达水平[(0.150±0.009)]及NR2B mRNA表达水平[(0.006±0.001)]相比,戒断2 h、6 h、12 h、1 d组NR2B荧光表达强度[(2710.56±194.21)、(5035.16±234.41)、(3326.23±378.16)、(2570.64±177.88)]、NR2B蛋白表达水平[(0.192±0.008)、(1.649±0.205)、(0.783±0.109)、(0.180±0.009)]及NR2BmRNA表达水平[(0.026±0.002)、(0.351±0.034)、(0.248±0.023)、(0.024±0.003)]均有明显增高(均P<0.05),且随着戒断时间的延长,表达逐渐上升,至戒断6 h达到高峰,其后开始下降,戒断3 d恢复至基线水平(P>0.05);戒断综合征评分与NR2B蛋白表达水平(r=0.719,P<0.01)、NR2B蛋白表达水平与NR2B mRNA表达水平(r=0.937,P<0.01)、NR2B mRNA表达水平与戒断综合征评分(r=0.673,P<0.01)均呈正相关。
结论慢性酒精暴露后戒断大鼠前3 d纹状体NR2B表达上调,NR2B蛋白和NR2B mRNA表达与戒断综合征评分呈正相关,调控NR2B表达可能是治疗酒依赖戒断症状的新靶点。