微小RNA-15b在胰腺癌中的表达及增殖、迁移、凋亡功能研究

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yanlian2008
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的

观察微小RNA(miRNA,miR)-15b在胰腺癌(PC)的表达及其对胰腺癌细胞株增殖、迁移、凋亡的影响。

方法

实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-15b在4种购自中国科学院细胞库的胰腺癌细胞株[SW1990、人胰腺癌细胞株(CFPAC-1)、PANC-1、BxPC-3]和购自美国ATCC细胞库的人正常胰腺导管上皮细胞细胞株(HPDE6c7)的表达量。将稳定转染miR-15b短发卡RNA(shRNA)的CFPAC-1、PANC-1作为实验组,以转染阴性对照(NC)正常表达miR-15b的CFPAC-1、PANC-1作为对照组。转染后细胞计数试剂盒(CCK-8)增殖实验检测CFPAC-1、PANC-1的增殖能力;Transwell迁移实验检测CFPAC-1、PANC-1的迁移能力;流式细胞术检测CFPAC-1、PANC-1的凋亡率。应用SPSS 19.0统计软件分析,计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,多组资料间比较使用单因素方差分析和LSD-t检验,计数资料采用率值表示,组间比较采用χ2检验。

结果

miR-15b在4株胰腺癌细胞株(SW1990、CFPAC-1、PANC-1、BxPC-3)的表达量(3.63±1.02、5.28±0.76、6.72±1.39、4.68±1.56)较HPDE6c7的表达量(1.08±0.23)明显增高,差异有统计学意义(t=9.944、10.326、12.013、15.877,P<0.01)。低表达miR-15b组的CFPAC-1在2、3、4 d细胞增殖能力shRNA(0.51±0.04、0.94±0.06、1.25±0.15)比对照组的CFPAC-1(0.68±0.06、1.21±0.09、1.95±0.12)显著下降,差异有统计学意义(t=8.256、6.350、7.002,P<0.05);低表达miR-15b组的PANC-1在2、3、4 d细胞增殖能力shRNA(0.48±0.05、0.76±0.13、1.44±0.25)比对照组的PANC-1(0.58±0.07、0.98±0.13、1.86±0.14)显著下降,差异有统计学意义(t=9.988、10.022、13.050,P<0.01)。低表达miR-15b组的CFPAC-1、PANC-1穿过Transwell小室的细胞数量[(38.47±4.69)个、(47.83±12.47)个]比对照组细胞数[(62.39±7.39)个、(68.97±8.44)个]明显减少,差异有统计学意义(t=5.798、8.465,P<0.05)。低表达miR-15b组CFPAC-1、PANC-1细胞凋亡率[(14.68±3.21)%、(11.57±2.52)%]较对照组细胞凋亡率[(4.29±1.42)%、(4.73±0.38)%]明显增高,差异有统计学意义(t=6.350、8.669,P<0.05)。

结论

miR-15b在PC细胞中高表达,低表达miR-15b会降低PC细胞的增殖和迁移能力,促进PC细胞凋亡。

其他文献
期刊
目的探讨以趾背动脉为蒂的甲皮瓣修复拇指甲床合并指背皮肤缺损的临床疗效。方法自2016年5月至2018年6月,我们对11例拇指甲床合并指背皮肤缺损患者采用以趾背动脉为蒂的甲皮瓣修复。术后定期随访患指恢复情况。结果本组所有甲皮瓣均顺利存活,伤口Ⅰ期愈合。随访时间为6~12个月,平均7.4个月,皮瓣质地和颜色与受区皮肤相近,指甲生长良好,外观与功能满意。皮瓣两点分辨觉恢复良好。结论以趾背动脉为蒂的甲皮瓣
目的介绍一种游离甲骨瓣与第二足趾胫侧皮瓣组合移植,改良再造拇指缺损的手术方法。方法根据拇指缺损情况,于同侧足第一、二足趾设计切取共干的甲骨瓣与第二足趾胫侧皮瓣,以甲骨瓣为主,将切取的第二足趾胫侧皮瓣横向转移到甲骨瓣的胫侧,与其瓦合重建甲骨瓣胫侧趾腹和甲皱襞,改善再造拇指外形,减小供区损伤。结果临床应用7例全部存活,供受区创口一期闭合。随访3~15个月,再造指外形美观,功能正常。按中华医学会手外科学
目的探讨miR-224在脂多糖(LPS)诱导的肺微血管内皮细胞(PMVEC)损伤中的作用及机制。方法分离清洁级BALB/c小鼠(购自浙江大学实验动物中心)原代PMVEC并体外培养,使用1.0 mg/L LPS处理PMVEC以诱导细胞损伤。通过转染miR-224抑制序列或p21的小干扰RNA(siRNA)序列分别下调PMVEC的微小RNA-224(miR-224)及p21表达水平。采用细胞计数试剂盒
目的观察人肝癌(HCC)细胞外泌体环状RNA(circRNA)-100338对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)血管形成能力的影响。方法提取、纯化和鉴定上海复旦大学肝癌研究所建立MHCC97H细胞来源外泌体,并共孵育中国科学院上海细胞所HUVEC细胞(37 ℃、5%CO2),外泌体示踪实验追踪外泌体能否被HUVEC细胞内化。采用Lipofectamine™ 2000转染试剂转染MHCC97H细胞,提取
目的观察细胞分裂调节蛋白1(PRC1)在胶质瘤中的表达特征及其水平高低对患者生存期的影响,以及体外调控其表达后对胶质瘤细胞的影响,探讨PRC1在胶质瘤中的临床意义。方法通过对胶质瘤数据库肿瘤基因组图谱(TCGA)中胶质瘤数据库挖掘PRC1 mRNA水平在胶质母细胞瘤与非肿瘤脑组织、不同WHO级别、病例类型间的水平差异,对56例胶质瘤肿瘤样本的免疫组织化学染色评价PRC1的表达特征及其与Ki67之间
目的观察SW1353细胞中唾液酸酶3(NEU3)表达及定位情况,探究过表达NEU3对人软骨肉瘤SW1353细胞增殖及迁移能力的影响。方法用Lipo3000转染试剂构建NEU3过表达细胞株,实验分组为4组:空白对照组un,不予任何处理;条件对照组blank,加入等剂量转染试剂;阴性对照组pcon,加入空载质粒;处理组pNEU3,加入NEU3基因过表达质粒。并用实时定量聚合酶链反应(Real-time
目的研究早期血液净化治疗重型颅脑损伤的临床意义。方法将2013年2月至2018年2月河北医科大学第三医院收治的重型颅脑损伤患者85例按随机数字表法随机分为连续血液净化治疗组(试验组)42例和传统治疗组(对照组)43例。连续血液净化治疗组患者在传统治疗方法的基础上早期采用连续性血液净化治疗时间为7 d,传统治疗组应用传统的治疗方法,检测两组患者发病1 d和5 d血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、神
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) MIF-AS1/微小RNA(miRNA,miR)-370-3p/丝裂原活化蛋白激酶9(MAP3K9)分子轴调控非小细胞肺癌(NSCLC)增殖、侵袭及迁移的分子机制。方法收集河南省人民医院2017年5月至2019年1月NSCLC患者20例标本,其中男12例,女8例,年龄(52.37±10.34)岁。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)与蛋白质印迹法
胰腺癌起病隐匿、进展迅速、预后极差,在我国发病人群有年轻化的趋势。早期诊断和精准治疗能有效地改善胰腺癌患者的预后,延长患者的生存期。因此,探索新的诊断方法和开发新的药物靶点依然是胰腺癌研究的关键点。环状RNA(circRNA)作为一类重要的非编码RNA分子,在多种恶性肿瘤中被证实与肿瘤的发生、发展、预后相关。由于其结构稳定、分布广泛、组织特异等特点,circRNA作为分子诊断标志物和药物靶点比其他