【摘 要】
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合成并鉴定T-2毒素人工抗原,通过动物免疫制备敏感性高、特异性好的鼠源T-2毒素多克隆抗血清.采用琥珀酸酐法将T-2毒素活化为T-2HS,T-2HS在碳二亚胺(EDC)作用下与牛血清白蛋
【机 构】
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河南省农业科学院农业部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471003;河南省农业科学院农业经济与信息研究中心,河南郑州,45
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合成并鉴定T-2毒素人工抗原,通过动物免疫制备敏感性高、特异性好的鼠源T-2毒素多克隆抗血清.采用琥珀酸酐法将T-2毒素活化为T-2HS,T-2HS在碳二亚胺(EDC)作用下与牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)偶联,合成免疫抗原T-2-BSA和检测抗原T-2-OVA,经鉴定后,分别按30、50 μg/只的剂量免疫BALB/c小鼠,共免疫4次,每次间隔4周,最后1次免疫10 d后,断尾采血,制备多抗血清.利用间接ELISA方法测定抗血清效价,间接竞争ELISA测定其敏感性和特异性.结果表明,免疫的6只小鼠效价均达到了1∶104以上,2号小鼠多抗血清的敏感性最好,其半数抑制质量浓度(IC50)为324 ng/mL,且具有良好的特异性.成功合成了T-2毒素人工抗原,制备了多克隆抗体血清,为T-2毒素单克隆抗体的刺备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础.
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