【摘 要】
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采用RT-PCR技术结合基因组步移技术,从大豆胞囊线虫(Heterodera glycines)中克隆了热激蛋白70基因(Hsp70)的全长cDNA序列(Hg-Hsp-70),全长1953bp,GenBank登录号为FJ816100.1.
【机 构】
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沈阳农业大学林学院,沈阳农业大学生命科学技术学院,黑龙江省农业科学院大庆分院,沈阳农业大学植物保护学院
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采用RT-PCR技术结合基因组步移技术,从大豆胞囊线虫(Heterodera glycines)中克隆了热激蛋白70基因(Hsp70)的全长cDNA序列(Hg-Hsp-70),全长1953bp,GenBank登录号为FJ816100.1.碱基序列分析结果表明,该序列含有9个外显子与8个内含子,与其它线虫具有较高的同源性.氨基酸序列分析表明,该基因编码650个氨基酸,相对分子量为70.7 kD,具有2个Hsp70基因家族的签名序列,与其它线虫的该基因氨基酸序列具有很高的同源性.构建了原核表达载体Hsp70pEASY-El,采用IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE电泳结果表明,当IPTG终浓度为0.2～1.2 mmol·L-1时均能显著诱导表达；以终浓度0.8 mmol·L-1的IPTG诱导5h蛋白表达量达到最大值.
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