【摘 要】
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目的:基因组荧光原位杂交(GISH)作为一种细胞遗传学的研究方法,以其特定的优点被越来越广泛的应用于杂种染色体分析、染色体行为考察等方面.采用适当的封阻DNA制备方法得到合
【机 构】
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应用海洋生物技术教育部重点实验室,宁波大学,宁波315211
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目的:基因组荧光原位杂交(GISH)作为一种细胞遗传学的研究方法,以其特定的优点被越来越广泛的应用于杂种染色体分析、染色体行为考察等方面.采用适当的封阻DNA制备方法得到合适的封阻DNA从而使得在基因组原位杂交中大大提高杂交效率,更能突显GISH方法的优势.方法:采用煮沸法和超声波破碎法对杂交鲷亲本真鲷(♀)、黑鲷(♂)DNA进行剪切研究了两种鲷类封阻DNA的制备.结果:煮沸15min时DNA已被切断.煮沸70 min以后,DNA片段更加集中,主要分布在500bp左右.煮沸90 min或者煮沸120 min以后发现,DNA电泳条带主要分布于250 bp附近,已达到GISH所需封阻DNA片段大小的要求.结论:煮沸法对基因组DNA的剪切,与超声波清洗仪剪切DNA相比,具有更高的效率.研究结果为基因组荧光原位杂交的顺利进行提供了条件.
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