结核分枝杆菌重组质粒pGEX-ESAT-6构建及其在大肠埃希菌BL21（DE3）中表达效率的研究

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：g1f2l3x4j5

【摘要】

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目的构建结核分枝杆菌（MTB）重组质粒pGEX-ESAT-6，分析ESAT-6抗原在大肠埃希菌BL21（DE3）中的表达效率。方法以结核分枝杆菌H37Rv标准株基因组DNA为模板，通过PCR扩增得到ESAT-6抗原编

【作者】

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谢婷李文桂

【机构】

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重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所

【出处】

：

中国病原生物学杂志

【发表日期】

：

2008年3期

【关键词】

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分枝杆菌结核重组质粒pGEX-ESAT-6 大肠埃希菌表达效率 Mycobacterium tuberculosis recombinant plasm

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目的构建结核分枝杆菌（MTB）重组质粒pGEX-ESAT-6，分析ESAT-6抗原在大肠埃希菌BL21（DE3）中的表达效率。方法以结核分枝杆菌H37Rv标准株基因组DNA为模板，通过PCR扩增得到ESAT-6抗原编码基因；将该基因定向克隆于含有谷胱甘肽-S-转移酶（GST）基因的高效原核表达载体pGEX-1λT，经酶切鉴定后以IPTG诱导表达ESAT-6／GST融合蛋白；SDS—PAGE及Western blot对表达产物进行鉴定。结果PCR扩增出288bp的ESAT-6基因；双酶切证实ESAT6基因成

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